抗核抗體
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抗核抗體（antinuclear antibody，ANA）又稱抗核酸抗原抗體，是一組將自身真核細胞的各種成分[脫氧核糖核蛋白（DNP）、DNA、可提取的核抗原（ENA）和RNA等]作為靶抗原的自身抗體的總稱，能與所有動物的細胞核發(fā)生反應(yīng)，主要存在于血清中，也可存在于胸水、關(guān)節(jié)滑膜液和尿液中。
目錄 |
原理簡介
抗核抗體在多種自身免疫病中均呈不同程度的陽性率，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE，95%~100%）、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA，10%~20%）、混合性結(jié)締組織病（MCTD，80%~100%）、干燥綜合癥（SjS,10%~40%）、全身性硬皮病（85%~90%）、狼瘡性肝炎（95%~100%）、原發(fā)性膽汁性肝硬化（95%~100%）等，但經(jīng)皮質(zhì)激素治療后，陽性率可降低?？购丝贵w在類風(fēng)濕病人中約有20％～50％IgG型ANA呈陽性，小兒類風(fēng)濕ANA的陽性率約19％～35％，伴發(fā)虹膜睫狀體炎者陽性率高（505~90%），故ANA陽性預(yù)示類風(fēng)濕有發(fā)生慢性睫狀體炎的可能。已發(fā)現(xiàn)75％類風(fēng)濕病人有多形核白細胞的特異性ANA或抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）可使白細胞核受到破壞。
詳細內(nèi)容
抗核抗體是一組對細胞核內(nèi)的DNA，RNA，蛋白或這些物質(zhì)的分子復(fù)合物的自身抗體。按其核內(nèi)各個分子的性能不同可將各ANA區(qū)分開來，如(一)抗DNA抗體，（二）抗組蛋白抗體，（三）抗非組蛋白抗體，（四）抗核仁抗體等。每一大類又因不同抗原特性而再分為許多種類。因此ANA在廣義上是一組各有不同臨床意義的自身抗體，更確切的名稱應(yīng)為抗核抗體譜。ANA 主要存在于IgG，也見于IgM 、IgA，甚至LgD及LgE中。
常見的核免疫熒光杭核抗體試驗有以下幾種圖形：（1）均質(zhì)型：核質(zhì)染色均勻一致，這種染色型常與抗組蛋白和抗DNA抗體有關(guān)；（2）斑點型：核質(zhì)染色呈斑點狀，抗可提取性核抗原（ENA）抗體常呈這種染色型；（3）周邊型：熒光染色圍繞在核膜周圍，它與抗DNA抗體有關(guān)；（4）核仁型：僅有核仁染色，具有抗4-6sRNA抗體呈現(xiàn)這種染色型；（5）著絲點型：在體外培養(yǎng)的細胞株（喉癌細胞）在核分裂相期時，可見到熒光染色的著絲點排列成特殊圖型，而在鼠肝做底物中看不到此類圖型，而被遺漏?！ ?/p>
標(biāo)本采集
采血3ml，不抗凝。
正常值范圍
滴度<1:10（間接熒光法）。
臨床意義
陽性：主要SLE患者，它的滴度可達1：320占86％，如果經(jīng)激素治療后緩解或危重時，大量抗核抗體形成免疫復(fù)合物時，ANA反為陰性，其他自身免疫性疾病，ANA也可出現(xiàn)陽性，但滴度低于1：80。
抗核抗體分類
抗核抗體的分類，由于核抗原不同，有多種不同的ANA ?！ ?/p>
抗DNA抗體
抗DNA抗體有抗雙鏈DNA（ds DNA）和抗單鏈(ss DNA)抗體之分。抗ds DNA抗體與SLE的關(guān)系密切，且隨疾病的活動度而升降，病情好轉(zhuǎn)者其滴度多下降甚或轉(zhuǎn)陰?？箂s DNA抗體則與抗ds DNA不同，可在多種疾病出現(xiàn)，包括一些非自身免疫性疾病，如細菌和病毒感染。故在臨床上無實用價值。而抗ds DNA抗體被認為是紅斑狼瘡（SLE）所特有。
測定本抗體的方法有間接免疫熒光法（IFA），放射免疫法（Farr法），ELISA，血凝法等。我國的臨床工作者多采用前兩種方法，尤其是IFA法。它是以短膜蟲或馬錐蟲為底物，利用其體內(nèi)含有的純雙鏈DNA，進行免疫熒光測定。 血清稀釋度達1：5或更高者稱為陽性。以Farr法測抗DNA抗體，結(jié)合率＞20％者為陽性。據(jù)北京協(xié)和醫(yī)院資料顯示，SLE陽性率為62％，活動期67.7％，緩解期29.1％，非SLE者陽性率雖達20％，但其結(jié)合率多在30％以下。有7％的正常人呈假性反應(yīng)。結(jié)合率高于30％者幾乎都是活動期SLE。
抗DNA的自身抗體在SLE發(fā)病中起一定作用。在一些SLE患者，DNA大分子存在于循環(huán)中或粘附于多種器官的微血管結(jié)構(gòu)，這些循環(huán)或器官原位抗原型DNA均可與循環(huán)自身抗體發(fā)生反應(yīng)，形成免疫復(fù)合物，激活炎癥系統(tǒng)，在一些器官如腎臟，肺和腦組織引起免疫復(fù)合物介導(dǎo)的疾病，導(dǎo)致組織損傷?！ ?/p>
抗可提取的核抗原
（extractable nuclear antigen.ENA）抗體，此抗體原經(jīng)鹽水或磷酸緩沖液處理，易從胞核中提取出來，且不含DNA。應(yīng)用免疫熒光技術(shù)，抗ENA抗體型染色多呈斑點型。此類抗原分為九種，故產(chǎn)生九種相應(yīng)抗體。
（1）抗核糖核蛋白抗體(antiribonucleoprotein；抗RNP抗體)：抗原來源與SM相同。它對去氧核糖核酸酶不敏感，但對核糖核酸酶，胰酶敏感。1972年把它作為診斷混合性結(jié)締組織?。∕CTD）的重要血清學(xué)依據(jù)。但以后發(fā)現(xiàn)本抗體可在多種風(fēng)濕性疾病出現(xiàn)，不具備對某個病的特異性，但有助于鑒別結(jié)締組織病和非結(jié)締組織病?？购薘NP抗體見于近32％的SLE患者，幾乎見于所有MCTD患者。
（2）抗SM抗體：SM系一患者Smith的簡稱。1966年Tan&Kunkel首先在患者Smith體中發(fā)現(xiàn)。抗原來源于小牛，兔胸腺，人脾等組織的一種酸性糖蛋白?？筍M抗體可見于1/3或以上的SLE患者，不出現(xiàn)于其他疾病中，對SLE診斷有特異性，成為很有價值的SLE診斷標(biāo)志，但無此抗體不能排除診斷。
（3）抗SS-A抗體：系在發(fā)現(xiàn)Sjogren氏綜合征（SS）的"A"抗原后而命名，主要見于SS。本抗原可以從人、牛、豬脾中提取。它除存在核內(nèi)外，也存在于細胞漿內(nèi)。對胰酶敏感，對核糖核酸酶抵抗，能耐熱（56度）。
（4）抗Ha抗體：抗Ha抗體可與小牛胸腺可溶性核提取物(以及小牛和鼠的肝提取物)起反應(yīng)。見于SS患者,亦稱之為SS-B抗體.應(yīng)用沉淀素反應(yīng)，補體結(jié)合以及熒光技術(shù)檢測。目前多數(shù)人認為13％SLE及33％SS患者有抗Ha沉淀性抗體。
（5）抗PM-1抗體：系多發(fā)性肌炎的特異性抗體?？乖敌∨Ｐ叵俸颂崛∥铮腥藭悍Q之為PM-1。最初有人應(yīng)用補體結(jié)合抑制試驗，確定該抗體特性，在皮肌類患者中發(fā)現(xiàn)PM-1抗體。有人測定在多發(fā)性肌類患者陽性率13.6％，皮肌類（DM）20％，系統(tǒng)性硬化并肌炎25％，SLE并肌炎偶有陽性，在其他疾病和正常人均陰性。說明本抗體對肌炎診斷有一定特異性。
（6）抗MA1抗體：為近年發(fā)現(xiàn)抗核酸蛋白抗原的抗體，稱之為抗MA1抗體。該抗體只出現(xiàn)于某些嚴重的SLE患者中。
（7）抗Scl-70抗體：因出現(xiàn)在硬皮病且其分子量為70000，故名?？乖瓰閴A性非組蛋白，北京協(xié)和醫(yī)院對系統(tǒng)性硬化用免疫雙擴散法測定得抗Scl-70抗體陽性率為60％。在其他結(jié)締組織和非結(jié)締組織病偶有陽性，而正常人均陰性，說明本抗體有較高的特異性，是系統(tǒng)性硬化的標(biāo)記抗體。
（8）抗Jo-1抗體：因患者而命名。國外報道在多發(fā)性肌炎（PM）患者陽性率為30-50％，合并有肺間質(zhì)纖維化的肌炎則達60％，而在皮肌炎（DM）患者則低于10％，在其他疾病均陰性。
（9）抗Ku抗體：因患者命名，國外報道本抗體多見于合并有肌炎的系統(tǒng)性硬化患者，陽性率達55％。
總之，抗PM-1，抗Jo-1，抗Ku都與肌炎有關(guān)?！ ?/p>
抗組蛋白抗體
組蛋白是一組堿性蛋白質(zhì)，含有稍高量的賴氨酸及精氨酸。是與DNA形成的復(fù)合物，結(jié)合成DNA一組蛋白。組蛋白抗體見于藥物誘發(fā)的SLE。國外報道，用免疫熒光三步法測23例藥物致狼瘡陽性率為96％，12例SLE中42％陽性。北京協(xié)和醫(yī)院以同樣方法檢測488例服用異煙肼，68例服用苯妥英鈉，40例服用復(fù)降片（內(nèi)含肼苯噠嗪），都在服用6個月以上者和另133例服他巴唑3個月以上者，無一例查到本抗體。這種差異可能與近年來我國服用肼苯噠嗪和普魯卡因酰胺的患者較少之故，也不能除外人種不同而造成的差異?！ ?/p>
抗著絲點抗體
其抗原為緊附于染色體著絲點的DNA蛋白質(zhì)。因此需要選擇分裂相活躍的細胞作為底物，這種細胞的著絲點較易被暴露。多選用人喉癌上皮細胞（HEP-2），其優(yōu)點是核大，分裂相多。國外報道本抗體多見于CREST綜合征（即表現(xiàn)為軟組織鈣化，雷諾現(xiàn)象，食管功能低下，指端硬化，毛細血管擴張）。陽性率達90％以上，稱之為CREST的標(biāo)記抗體。根據(jù)協(xié)和醫(yī)院觀察測定結(jié)果，我國系統(tǒng)性硬化絕大部分是彌散型，CREST型極少見；抗著絲點抗體的陽性率在系統(tǒng)性硬化為20％，CREST型38％，彌散型10％，說明它不一定是CREST型的標(biāo)記抗體?！ ?/p>
抗核仁抗體
抗核仁抗體是一組對核仁不同RNA成分的抗體。由于成分（4-6sRNA）不同，因此構(gòu)成斑塊，斑點，均質(zhì)等不同圖型。本核體在以HEP-2細胞為底物間接免疫熒光檢查為明顯。協(xié)和醫(yī)院免疫組的陽性率是PSS38.5％，SLE6.1％，RA15.3％，（陽性者都合并有指端硬化），SS8.6％，PM/DM10.0％，雷諾現(xiàn)象25％，其他結(jié)締組織病和正常人均陰性?？购巳士贵w不僅在PSS最多見，且滴度亦高，故它對PSS診斷有一定的幫助。
抗核抗體的檢測在自身免疫病的臨床診斷、鑒別診斷、評價療效和預(yù)后估計中具有較大的意義，因此常將抗核抗體的檢測作為自身免疫病的重要初篩試驗。
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