類風(fēng)濕因子
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類風(fēng)濕因子是由于感染因子(細菌、病毒等)引起體內(nèi)產(chǎn)生的以變性IgG(一種抗體)為抗原的一種抗體,故又稱抗抗體。常見的類風(fēng)濕因子有I gM型、IgG型IgA型和IgE型。人體內(nèi)普遍存在著類風(fēng)濕因子,并起著一定的生理作用。近年來對IgM型類風(fēng)濕因子的生物作用已有所了解。類風(fēng)濕因子檢查是診斷類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的常規(guī)檢查。類風(fēng)濕因子存在于許多類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi),但也可能存在于其他自身免疫性疾病,并非只見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎病人。不是所有類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的類風(fēng)濕因子檢查結(jié)果都是陽性,類風(fēng)濕因子檢查結(jié)果呈陽性的患者占類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者的70%~80%,早期患者類風(fēng)濕因子呈陽性的比例會小很多。由于I gM型類風(fēng)濕因子是類風(fēng)濕因子的主要類型,而且具有高凝集的特點,易于沉淀,故臨床上主要測定IgM型類風(fēng)濕因子,測定方法為乳膠凝集法和酶聯(lián)免疫吸附法。
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類風(fēng)濕因子(RF)測定
類風(fēng)濕因子(RF)是在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)病人血清中發(fā)現(xiàn),是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體,主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液中,它是一種抗變性IgG的抗體,屬IgM型??膳cIgGFc段結(jié)合。RA病人和約50%的健康人體內(nèi)都存在有產(chǎn)生RF的B細胞克隆,在變性IgG(或與抗原結(jié)合的IgG)或EB病毒直接作用下,可大量合成RF。健康人產(chǎn)生RF的細胞克隆較少,且單核細胞分泌的可溶性因子可抑制RF的產(chǎn)生,故一般不易測出。RF主要為IgM類自身抗體,但也有IgG類、IgA類、IgD類和IgE類。各類RF臨床意義有所不同。測定IgG、IgA、IgM類RF通常用ELISA間接法,即用熱凝集兔IgG包被反應(yīng)板微孔,加入檢樣后,再分別加抗人IgG、IgA、IgM酶標(biāo)記抗體,使反應(yīng)后再與底物呈色。為防止各Ig類別RF相互干擾,酶標(biāo)記抗體使用標(biāo)記的抗體F(ab’)2片段?! ?/p>
原理
將變性IgG包被于聚苯乙烯膠乳顆粒上,這種致敏膠乳在與待測血清中的RF相遇時,即發(fā)生肉眼可見的凝集,此稱膠乳凝集試驗。
在用熱凝集變性IgG包被聚苯乙烯反應(yīng)板的微孔中,加入待測血清,如有RF存在,則相互結(jié)合,隨后再加入酶標(biāo)記熱凝集變性的IgG與之反應(yīng),在加入底物后即可顯色。根據(jù)顯色程度可判斷有無RF存在及其水平,此為雙抗原夾心ELISA法?! ?/p>
膠乳凝集試驗:
RF是一種主要發(fā)生于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)的抗人變性IgG抗體,可與IgG的Fc段結(jié)合。將變性IgG包被于聚苯乙烯膠乳顆粒上,此致敏膠乳在與待測血清中的RF相遇時,即可發(fā)生肉眼可見的凝集?! ?/p>
操作
1、56℃30分鐘滅活,(滅活C1q以阻止假陽性凝集)。將待測血清用0.1mol/L PH8.2甘氨酸緩沖鹽水作1:20稀釋(生理鹽水1ml中加血清0.05ml)。
2、取此稀釋血清1滴(約0.05ml),加于黑色方格玻片的方格內(nèi),加乳膠RF試劑1滴,立即搖動反應(yīng)板3分鐘,使其充分混勻后,于直射光下觀察。每次試驗均設(shè)陽性與陰性對照。
參考值
正常人1:20稀釋血清為陰性?! ?/p>
結(jié)果判斷
膠乳凝集試驗正常人多為陰性反應(yīng),如3分鐘內(nèi)出現(xiàn)顯凝集者為陽性。陽性反應(yīng)的標(biāo)本應(yīng)將血清進行倍比稀釋測定滴度。ELISA法可根據(jù)顯色程度,與陽性和陰性對照參比,作出陽性或陰性的判斷。
臨床意義
RF主要為IgM類自身抗體,但也有IgG類、IgA類和IgE類。各類RF臨床意義有所不同。RF是一種以變性IgG為靶抗原的自身抗體。未經(jīng)治療的類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者其陽性率為80%,且滴定度常在1:160以上。臨床上動態(tài)觀察滴定度多少,可作為病變活動及藥物治療后療效的評價。其他風(fēng)濕性疾病如SLE陽性率為20%—25%;硬皮病與皮肌炎陽性率為10%—24%,滴定度較低。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)患者和約50%的健康人體內(nèi)都存在有產(chǎn)生RF的B細胞克隆,在變性IgG(與抗原結(jié)合的IgG)或EB病毒直接作用下,可大量合成RF。健康人產(chǎn)生RF的細胞克隆較少,且單核細胞分泌的可溶性因子可抑制RF的產(chǎn)生,故一般不易測出。RF有IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五類,用凝集試驗法測出的主要是IgM類。多數(shù)作者認(rèn)為,IgM類RF的含量與RA的活動性無密切關(guān)系;IgG類RF的含量與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀密切相關(guān)。IgA類RF見于RA、硬皮病、Felty綜合征和系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病,是RA臨床活動的一個指標(biāo)。IgD類RF研究甚少。IgE類RF除RA患者外,也見于Felty綜合征和青年型RA。在RA患者,高效價的RF存在并伴有嚴(yán)重的關(guān)節(jié)功能受限時,常提示預(yù)后不良。在非類風(fēng)濕患者中,RF的陽性率隨年齡的增加而增加,但這些人以后發(fā)生RA者極少?!?/p>
強調(diào):類風(fēng)濕因子并非類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎所獨有,也并非每一例類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的患者都陽性,這點必須強調(diào)。故臨床診斷應(yīng)該相結(jié)合其他方面信息方可。
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給類風(fēng)濕因子條目的留言--江南一根針 2015年4月18日 (六) 08:28 (CST) 留言:本質(zhì)是抗IgGFC的自身抗體IgM。 | |
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